CDC20

Перейти к навигацииПерейти к поиску
Цикл клеточного деления 20
Доступные структуры
PDBПоиск ортологов: PDBe, RCSB
Идентификаторы
СимволCDC20 ; CDC20A; bA276H19.3; p55CDC
Внешние IDOMIM: 603618 MGI1859866 HomoloGene37459 GeneCards: Ген CDC20
Профиль экспрессии РНК
Больше информации
Ортологи
ВидЧеловекМышь
Entrez991107995
EnsemblENSG00000117399ENSMUSG00000006398
UniProtQ12834Q9JJ66
RefSeq (мРНК)NM_001255NM_023223
RefSeq (белок)NP_001246NP_075712
Локус (UCSC)Chr 1:
43.82 – 43.83 Mb
Chr 4:
118.43 – 118.44 Mb
Поиск в PubMedИскатьИскать

Белок цикла клеточного деления 20 — регулятор клеточного деления, кодируемый в организме человека геном CDC20[1][2]. На уровне современных знаний его наиболее важная функция — активация комплекса стимуляции анафазы (APC/C), большого комплекса из 11-13 субъединиц, который инициирует разделение хроматид и вход в анафазу. Белковый комплекс APC/CCdc20 имеет две основные нижестоящие цели. Во-первых, он нацелен на разрушение секурина, что позволяет в конечном итоге разрушение когезина и, таким образом, разделение сестринских хроматид. Он также нацелен на S и М-фазы (S/M) циклинов для их разрушения, которое инактивирует S/M циклин-зависимые киназы (Cdk) и позволяет клетке выйти из митоза. Тесно связанный белок, Cdc20homologue-1 (Cdh1) играет вспомогательную роль в клеточном цикле.

Cdc20 действует в качестве регуляторного белка, взаимодействующего со многими другими белками в нескольких точках в клеточном цикле. Это требуется для двух зависимых от микротрубочек процессов: ядерного движения до анафазы и разделения хромосом[3].

Открытие

CDC20, вместе с другими белками Cdc, был обнаружен в начале 1970-х годов, когда Хартвелл и его коллеги делали цикл клеточного деления мутантов, в котором не смогли завершить основные события клеточного цикла в штамме дрожжей S. Cerevisiae[4]. Хартвелл нашёл мутантов, которые не входили в анафазу и, таким образом, не могли завершить митоз; этот фенотип связан с геном Cdc20[5]. Однако, даже после того как была в конечном итоге выяснена биохимия белка, молекулярная роль Cdc20 оставалась неуловимой до открытия APC/C в 1995 году[6][7].

Структура

Cdc20 является белком, связанным с бета-субъединицей гетеротримерных G белков. Возле своего С-конца она содержит семь повторов WD40[англ.], которые представляют собой несколько коротких, структурных мотивов около 40 аминокислот, которые часто играют важную роль в связывании с крупными белковыми комплексами. В случае Cdc20, они образуют семилопастной бета пропеллер. Человеческий Cdc20 имеет в длину около 499 аминокислот и содержит по крайней мере четыре сайта фосфорилирования вблизи N-конца. В промежутке между этими сайтами фосфорилирования, которые играют регуляторную роль, находится С-бокс, КEN-бокс, взаимодействующий мотив Mad2, и Cry-бокс. КEN-бокс, а также Cry-бокс, являются важными последовательностями распознавания и деградации комплекса APC/CCdh1.

Взаимодействия

Cdc20, как было выявлено, взаимодействует с:

Самым важным взаимодействием Cdc20 является взаимодействие с комплексом стимуляции анафазы. APC/С — большая убиквитинлигаза Е3, которая вызывает переход от метафазы к анафазе выбранных белков для деградации. Двумя основными целями в APC/C являются циклины S/M и белок секурин. S/M циклины активируют циклин-зависимые киназы (Cdk), которые имеют широкий спектр нижестоящих эффектов, руководящих работой клетки путём митоза. Они должны быть деградированы для клеток, выходящих в митоз. Секурин — белок, который подавляет сепаразу, которая, в свою очередь ингибирует кохезин — белок, который содержит совместно сестринские хроматиды. Таким образом, для того, чтобы прогрессировать анафазе, секурин должен быть заблокирован, чтобы кохезин мог расщеплять сепаразу. Эти процессы зависят как от APC/C, так и Cdc20: Когда Cdk фосфорилируют APC/C, Cdc20 может связываться и активировать его, что позволяет как деградацию Cdk, так и расщепление кохезина. Активность APC/C зависит от Cdc20 (и Cdh1), потому что Cdc20 часто связывает субстраты APC/C напрямую[28]. На самом деле, считается, что Cdc20 и Cdh1 — рецепторы для мотивов KEN-бокса и D-бокса в субстратах[29]. Тем не менее, этой последовательности, как правило, недостаточно для убиквитинирования и деградации; многое ещё предстоит узнать о том, как Cdc20 связывает его субстраты.

Регуляция

Комплекс APC/CCdc20 регулирует себя таким образом, что он присутствует в течение соответствующего времени клеточного цикла. Для того, чтобы Cdc20 связывал APC/C, конкретные субъединицы APC/C должны быть фосфорилированы Cdk1 (среди других Cdk). Поэтому, когда Cdk активирует высокий митоз, и клетки готовы войти в анафазу и выйти в митоз, комплекс APC/CCdc20 активирован. После активации, комплекс APC/CCdc20 способствует деградации Cdk путём инактивации S/M циклина. Деградация Cdk характеризуется более низким уровнем фосфорилирования APC/C и, таким образом, более низкой степенью связывания Cdc20. Таким образом, комплекс APC/CCdc20 инактивирует себя к концу митоза[30]. Однако, поскольку клетка не сразу входит в клеточный цикл, Cdk не может быть немедленно реактивирован. Несколько отличнные механизмы ингибирования Cdk в G1: белки ингибиторов Cdk экспрессируются, и экспрессия гена циклина подавляется. От накопления циклина предохраняет Cdh1[30].

Cdc20 и Cdh1

Cdc20-гомолог 1 (Cdh1) играет вспомогательную роль для Cdc20 в прогрессировании клеточного цикла. Во время активности APC/CCdc20, Cdh1 фосфорилируется и не может связываться с APC/C. После метафазы, однако, S/M-Cdk инактивируются APC/CCdc20 и Cdh1 может существовать в нефосфорилированном состоянии и связывать APC/C. Это позволяет APC/C продолжать деградацию S/M циклина (и, следовательно, S/M Cdk), пока они не потребуются снова в следующем S-фазе. Как могут S/M циклины снова ввести клетку в митоз? APC/CCdc20 не распознаёт G1/S циклины. Их концентрация возрастает во время G1, активации G1/S Cdk, которые, в свою очередь фосфорилируют Cdh1 и постепенно уменьшают ингибицию S/M циклинов[30].

Контрольная точка сборки веретена деления

Cdc20 также часть регуляции контрольной точки веретена деления (SAC). Это гарантирует, что контрольная точка проходит анафазу только тогда, когда центромеры всех сестринских хроматид выстроились в метафазной пластине с правильным соединеникм с микротрубочками. Контрольная точка проходит активной любой одинокий центромер; только тогда, когда все центромеры прикреплены, начнется анафаза. APC/CCdc20 является важным объектом SAC, который состоит из нескольких различных белков, в том числе Mad2, Mad3 (BubR1), и Bub3. На самом деле, эти три белка, вместе с Cdc20, вероятно, образуют комплекс митотической контрольной точки (MCC), который ингибирует APC/CCdc20, так что анафаза не может начаться преждевременно. Кроме того, Bub1 фосфорилирует и тем самым тормозит Cdc20 непосредственно, в то время как в дрожжевых Mad2 и Mad3, когда они связаны с Cdc20, вызывает автоубиквитинизацию[31].

Ингибиторы CDC20

Ингибирование ортолога CDC20 fzy-1 посредством РНК-интерференции значительно продлевало жизнь червячка C. elegans. В связи с этим предполагается что, ингибирование CDC20, снижая излишнюю пролиферацию клеток, влияет на механизмы старения.[32] CDC20 часто сверхэкспрессируется в различных злокачественных опухолях, способствуя их устойчивости как к химиотерапии, так и к радиотерапии.[33] Поэтому идет поиск фармацевтических препаратов способных эффективно подавлять CDC20. Известно несколько ингибиторов CDC20 потенциально пригодных для лечения рака (например, малая молекула апцин и его аналоги[34][35], сапонин диосгенин[англ.] из пажитника,[36] и куркумин,[37] среди прочих.

Примечания

  1. Weinstein J., Jacobsen F.W., Hsu-Chen J., Wu T., Baum L.G. A novel mammalian protein, p55CDC, present in dividing cells is associated with protein kinase activity and has homology to the Saccharomyces cerevisiae cell division cycle proteins Cdc20 and Cdc4 (англ.) // Mol Cell Biol : journal. — 1994. — May (vol. 14, no. 5). — P. 3350—3363. — PMID 7513050. — PMC 358701.
  2. Weinstein J. Cell cycle-regulated expression, phosphorylation, and degradation of p55Cdc. A mammalian homolog of CDC20/Fizzy/slp1 (англ.) // J Biol Chem : journal. — 1997. — December (vol. 272, no. 45). — P. 28501—28511. — doi:10.1074/jbc.272.45.28501. — PMID 9353311.
  3. Entrez Gene: CDC20 cell division cycle 20 homolog (S. cerevisiae).
  4. Hartwell L.H., Culotti J., Reid B. Genetic Control of the Cell-Division Cycle in Yeast, I. Detection of Mutants (англ.) // Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America : journal. — 1970. — June (vol. 66, no. 2). — P. 352—359. — doi:10.1073/pnas.66.2.352. — PMID 5271168. — PMC 283051.
  5. Hartwell L.H., Mortimer R.K., Culotti J., Culotti M. Genetic Control of the Cell Division Cycle in Yeast: V. Genetic Analysis of cdc Mutants (англ.) // Genetics : journal. — 1973. — June (vol. 74, no. 2). — P. 267—286. — PMID 17248617. — PMC 1212945.
  6. King R.W., Peters J.M., Tugendreich S., Rolfe M., Hieter P., Kirschner M.W. A 20S complex containing CDC27 and CDC16 catalyzes the mitosis-specific conjugation of ubiquitin to cyclin B (англ.) // Cell : journal. — Cell Press, 1995. — April (vol. 81, no. 2). — P. 279—288. — doi:10.1016/0092-8674(95)90338-0. — PMID 7736580.
  7. Sudakin V., Ganoth D., Dahan A., Heller H., Hershko J., Luca F.C., Ruderman J.V., Hershko A. The cyclosome, a large complex containing cyclin-selective ubiquitin ligase activity, targets cyclins for destruction at the end of mitosis (англ.) // Molecular Biology of the Cell : journal. — 1995. — February (vol. 6, no. 2). — P. 185—197. — doi:10.1091/mbc.6.2.185. — PMID 7787245. — PMC 275828.
  8. 1 2 3 Vodermaier H.C., Gieffers C., Maurer-Stroh S., Eisenhaber F., Peters J.M. TPR subunits of the anaphase-promoting complex mediate binding to the activator protein CDH1 (англ.) // Curr. Biol. : journal. — 2003. — September (vol. 13, no. 17). — P. 1459—1468. — ISSN 0960-9822. — doi:10.1016/S0960-9822(03)00581-5. — PMID 12956947.
  9. 1 2 3 4 5 Nilsson J., Yekezare M., Minshull J., Pines J. The APC/C maintains the spindle assembly checkpoint by targeting Cdc20 for destruction (англ.) // Nat. Cell Biol. : journal. — 2008. — December (vol. 10, no. 12). — P. 1411—1420. — doi:10.1038/ncb1799. — PMID 18997788. — PMC 2635557.
  10. Fang G. Checkpoint Protein BubR1 Acts Synergistically with Mad2 to Inhibit Anaphase-promoting Complex (англ.) // Molecular Biology of the Cell : journal. — 2002. — March (vol. 13, no. 3). — P. 755—766. — ISSN 1059-1524. — doi:10.1091/mbc.01-09-0437. — PMID 11907259. — PMC 99596.
  11. Wu H., Lan Z., Li W., Wu S., Weinstein J., Sakamoto K.M., Dai W. p55CDC/hCDC20 is associated with BUBR1 and may be a downstream target of the spindle checkpoint kinase (англ.) // Oncogene : journal. — 2000. — September (vol. 19, no. 40). — P. 4557—4562. — ISSN 0950-9232. — doi:10.1038/sj.onc.1203803. — PMID 11030144.
  12. 1 2 3 4 Kallio M.J., Beardmore V.A., Weinstein J., Gorbsky G.J. Rapid microtubule-independent dynamics of Cdc20 at kinetochores and centrosomes in mammalian cells (англ.) // J. Cell Biol.[англ.] : journal. — 2002. — September (vol. 158, no. 5). — P. 841—847. — ISSN 0021-9525. — doi:10.1083/jcb.200201135. — PMID 12196507. — PMC 2173153.
  13. Sudakin V., Chan G.K., Yen T.J. Checkpoint inhibition of the APC/C in HeLa cells is mediated by a complex of BUBR1, BUB3, CDC20, and MAD2 (англ.) // J. Cell Biol.[англ.] : journal. — 2001. — September (vol. 154, no. 5). — P. 925—936. — ISSN 0021-9525. — doi:10.1083/jcb.200102093. — PMID 11535616. — PMC 2196190.
  14. 1 2 Skoufias D.A., Andreassen P.R., Lacroix F.B., Wilson L., Margolis R.L. Mammalian mad2 and bub1/bubR1 recognize distinct spindle-attachment and kinetochore-tension checkpoints (англ.) // Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America : journal. — 2001. — April (vol. 98, no. 8). — P. 4492—4497. — doi:10.1073/pnas.081076898. — PMID 11274370. — PMC 31862.
  15. 1 2 3 Kallio M., Weinstein J., Daum J.R., Burke D.J., Gorbsky G.J. Mammalian p55CDC Mediates Association of the Spindle Checkpoint Protein Mad2 with the Cyclosome/Anaphase-promoting Complex, and is Involved in Regulating Anaphase Onset and Late Mitotic Events (англ.) // J. Cell Biol.[англ.] : journal. — 1998. — June (vol. 141, no. 6). — P. 1393—1406. — ISSN 0021-9525. — doi:10.1083/jcb.141.6.1393. — PMID 9628895. — PMC 2132789.
  16. 1 2 D'Angiolella V., Mari C., Nocera D., Rametti L., Grieco D. The spindle checkpoint requires cyclin-dependent kinase activity (англ.) // Genes Dev. : journal. — 2003. — October (vol. 17, no. 20). — P. 2520—2525. — ISSN 0890-9369. — doi:10.1101/gad.267603. — PMID 14561775. — PMC 218146.
  17. 1 2 Wassmann K., Benezra R. Mad2 transiently associates with an APC/p55Cdc complex during mitosis (англ.) // Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America : journal. — 1998. — September (vol. 95, no. 19). — P. 11193—11198. — ISSN 0027-8424. — doi:10.1073/pnas.95.19.11193. — PMID 9736712. — PMC 21618.
  18. Kramer E.R., Gieffers C., Hölzl G., Hengstschläger M., Peters J.M. Activation of the human anaphase-promoting complex by proteins of the CDC20/Fizzy family (англ.) // Curr. Biol. : journal. — 1998. — November (vol. 8, no. 22). — P. 1207—1210. — ISSN 0960-9822. — doi:10.1016/S0960-9822(07)00510-6. — PMID 9811605.
  19. Ohtoshi A., Maeda T., Higashi H., Ashizawa S., Hatakeyama M. Human p55(CDC)/Cdc20 associates with cyclin A and is phosphorylated by the cyclin A-Cdk2 complex (англ.) // Biochem. Biophys. Res. Commun.[англ.] : journal. — 2000. — February (vol. 268, no. 2). — P. 530—534. — ISSN 0006-291X. — doi:10.1006/bbrc.2000.2167. — PMID 10679238.
  20. Hsu J.Y., Reimann J.D., Sørensen C.S., Lukas J., Jackson P.K. E2F-dependent accumulation of hEmi1 regulates S phase entry by inhibiting APC/C(Cdh1) (англ.) // Nat. Cell Biol. : journal. — 2002. — May (vol. 4, no. 5). — P. 358—366. — ISSN 1465-7392. — doi:10.1038/ncb785. — PMID 11988738.
  21. 1 2 Yoon Y.M., Baek K.H., Jeong S.J., Shin H.J., Ha G.H., Jeon A.H., Hwang S.G., Chun J.S., Lee C.W. WD repeat-containing mitotic checkpoint proteins act as transcriptional repressors during interphase (англ.) // FEBS Lett.[англ.] : journal. — 2004. — September (vol. 575, no. 1—3). — P. 23—9. — ISSN 0014-5793. — doi:10.1016/j.febslet.2004.07.089. — PMID 15388328.
  22. Zhang Y., Lees E. Identification of an Overlapping Binding Domain on Cdc20 for Mad2 and Anaphase-Promoting Complex: Model for Spindle Checkpoint Regulation (англ.) // Mol. Cell. Biol. : journal. — 2001. — August (vol. 21, no. 15). — P. 5190—5199. — ISSN 0270-7306. — doi:10.1128/MCB.21.15.5190-5199.2001. — PMID 11438673. — PMC 87243.
  23. Sihn C.R., Suh E.J., Lee K.H., Kim T.Y., Kim S.H. p55CDC/hCDC20 mutant induces mitotic catastrophe by inhibiting the MAD2-dependent spindle checkpoint activity in tumor cells (англ.) // Cancer Lett.[англ.] : journal. — 2003. — November (vol. 201, no. 2). — P. 203—210. — ISSN 0304-3835. — doi:10.1016/S0304-3835(03)00465-8. — PMID 14607335.
  24. Luo X., Fang G., Coldiron M., Lin Y., Yu H., Kirschner M.W., Wagner G. Structure of the Mad2 spindle assembly checkpoint protein and its interaction with Cdc20 (англ.) // Nat. Struct. Biol. : journal. — 2000. — March (vol. 7, no. 3). — P. 224—229. — ISSN 1072-8368. — doi:10.1038/73338. — PMID 10700282.
  25. Sironi L., Melixetian M., Faretta M., Prosperini E., Helin K., Musacchio A. Mad2 binding to Mad1 and Cdc20, rather than oligomerization, is required for the spindle checkpoint (англ.) // EMBO J. : journal. — 2001. — November (vol. 20, no. 22). — P. 6371—6382. — ISSN 0261-4189. — doi:10.1093/emboj/20.22.6371. — PMID 11707408. — PMC 125308.
  26. Fang G., Yu H., Kirschner M.W. The checkpoint protein MAD2 and the mitotic regulator CDC20 form a ternary complex with the anaphase-promoting complex to control anaphase initiation (англ.) // Genes Dev. : journal. — 1998. — June (vol. 12, no. 12). — P. 1871—1883. — ISSN 0890-9369. — doi:10.1101/gad.12.12.1871. — PMID 9637688. — PMC 316912.
  27. Privette L.M., Weier J.F., Nguyen H.N., Yu X., Petty E.M. Loss of CHFR in Human Mammary Epithelial Cells Causes Genomic Instability by Disrupting the Mitotic Spindle Assembly Checkpoint (англ.) // Neoplasia : journal. — 2008. — July (vol. 10, no. 7). — P. 643—652. — PMID 18592005. — PMC 2435002.
  28. Vodermaier H.C. Cell cycle: Waiters serving the Destruction machinery (англ.) // Curr. Biol. : journal. — 2001. — October (vol. 11, no. 20). — P. R834—7. — doi:10.1016/S0960-9822(01)00498-5. — PMID 11676939.
  29. Kraft C., Vodermaier H.C., Maurer-Stroh S., Eisenhaber F., Peters J.M. The WD40 propeller domain of Cdh1 functions as a destruction box receptor for APC/C substrates (англ.) // Mol. Cell[англ.] : journal. — 2005. — May (vol. 18, no. 5). — P. 543—553. — doi:10.1016/j.molcel.2005.04.023. — PMID 15916961.
  30. 1 2 3 Morgan D. L. The cell cycle: principles of control (англ.). — London: Published by New Science Press in association with Oxford University Press, 2007. — ISBN 0-87893-508-8.
  31. Yu H. Cdc20: a WD40 activator for a cell cycle degradation machine (англ.) // Mol. Cell[англ.] : journal. — 2007. — July (vol. 27, no. 1). — P. 3—16. — doi:10.1016/j.molcel.2007.06.009. — PMID 17612486.
  32. Coler-Reilly, A., Pincus, Z., Scheller, E. L., & Civitelli, R. (2024). Six drivers of aging identified among genes differentially expressed with age. bioRxiv, 2024-08. doi:10.1101/2024.08.02.606402
  33. Gao, Y., Wen, P., Shao, C., Ye, C., Chen, Y., You, J., & Su, Z. (2024). CDC20 Holds Novel Regulation Mechanism in RPA1 during Different Stages of DNA Damage to Induce Radio-Chemoresistance. International Journal of Molecular Sciences, 25(15), 8383. PMID 39125953 PMC 11312485 doi:10.3390/ijms25158383
  34. Bhuniya, R., Yuan, X., Bai, L., Howie, K. L., Wang, R., Li, W., ... & Yang, C. Y. (2022). Design, synthesis, and biological evaluation of apcin-based CDC20 inhibitors. ACS Medicinal Chemistry Letters, 13(2), 188-195. PMID 35178174 PMC 8842116 doi:10.1021/acsmedchemlett.1c00544
  35. He, Y., Le, X., Hu, G., Li, Q., & Chen, Z. (2023). Discovery of Ureido-Based Apcin Analogues as Cdc20-specific Inhibitors against Cancer. Pharmaceuticals, 16(2), 304. PMID 37259447 PMC 9964651 doi:10.3390/ph16020304
  36. Arya, P., Munshi, M., & Kumar, P. (2023). Diosgenin: Chemistry, extraction, quantification and health benefits. Food Chemistry Advances, 2, 100170. doi:10.1016/j.focha.2022.100170
  37. Zhang, Y., Xue, Y. B., Li, H., Qiu, D., Wang, Z. W., & Tan, S. S. (2017). Inhibition of cell survival by curcumin is associated with downregulation of cell division cycle 20 (Cdc20) in pancreatic cancer cells. Nutrients, 9(2), 109. PMID 28165402 PMC 5331540 doi:10.3390/nu9020109

Литература